全封闭式薄膜过滤器在药物微生物限度检查中的应用

【摘要】目的 运用全封闭式薄膜过滤器进行药品微生物限度检查。方法 用智能集菌仪的全封闭式薄膜过滤器检查新霉素滴眼液中金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。结果 阳性对照呈阳性，阴性对照呈阴性，供试品澄清无菌生长。结论 运用全封闭式薄膜过滤器进行药品微生物限度检查简单，准确，值得采用。

【关键词】全封闭式薄膜过滤器;微生物限度检查

【Abstract】 Objective To use the totally enclosed thin-film filters to take the microbial limit test of drugs.Methods The totally enclosed thin-film filters of smart bacteria-collecting instrument was used to examine the staphylococcus aureus and pseudomonas aeruginosa in neomycin eye drops.Results The positive control was positive, and the negative control was negative, no bacterial growth was found in the samples.Conclusion This method is simple, accurate, and it can be used for the microbial limit test of drugs.

【Key words】 totally enclosed thin-film filters; microbial limit test

在进行药品微生物限度检查中，当供试品含抑菌成分时，可采用沉降法、离心沉淀法、薄膜过滤法排除其抑菌作用，但以上常规方法由于供试品长时间暴露于空气中，易污染而影响结果的可靠性。笔者运用全封闭式薄膜过滤器进行药品微生物限度检查，方法简单且准确，可大大降低出现假阳性的可能。

1 仪器与试剂

1.1 仪器 HTY-Ⅲ型智能集菌仪，封闭式薄膜过滤器(杭州泰林医疗器械厂)，电热恒温培养箱。

1.2 试剂 新霉素滴眼液，0.9%无菌氯化钠溶液(稀释剂)，胆盐乳糖增菌液(BL),营养肉汤培养基，溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基，甘露醇氯化钠琼脂培养基，金黄色葡萄球菌[CMCC(B) 26 003],铜绿假单胞菌[CMCC(B) 10 104](中国药品生物制品检定所提供)。

2 方法与结果

2.1 供试液制备 取新霉素滴眼液10ml，加稀释剂90ml，摇匀，制成1：10供试液。

2.2 菌液的制备 按《中国药典》2005年版二部方法制备浓度为50～100cfu/ml[1]。

2.3 金黄色葡萄球菌检查方法 取封闭式过滤器，关闭其中两管通道，先将稀释剂通过未关闭的滤管，作阴性对照，稀释剂通过后关闭此滤管，然后放开另两滤管，取供试液20ml置装稀释剂200ml的灭菌带橡皮塞的瓶中，摇匀，通过放开的两滤管，放开关闭的滤管，用稀释剂冲洗滤器3次，每次各管100ml，再将营养肉汤培养基300ml分别加至封闭式过滤器内(各100ml)，其中一管加金黄色葡萄球菌阳性对照菌液，放入电热恒温培养箱培养24h，再将培养液划线接种于甘露醇氯化钠琼脂培养基平板上，培养24h，观察结果。

2.4 铜绿假单胞菌检查方法 取封闭式过滤器，关闭其中两管通道，先将稀释剂通过未关闭的滤管，作阴性对照，稀释剂通过后关闭此滤管，然后放开另两滤管，取供试液20ml置装稀释剂200ml的灭菌带橡皮塞的瓶中，摇匀，通过放开的两滤管，放开关闭的滤管，用稀释剂冲洗滤器3次，每次各管100ml，再将胆盐乳糖增菌液(BL)300ml分别加至封闭式过滤器内(各100ml)，其中一管加铜绿假单胞菌阳性对照菌液，放入电热恒温培养箱培养24h，再将培养液划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上，培养24h，观察结果。

2.5 结果 新霉素滴眼液24h培养后无菌生长。阳性对照呈阳性，阴性对照呈阴性。符合《中国药典》2005年版二部的微生物限度检查中控制菌的规定[1]。

3 讨论

本试验成功运用全封闭式薄膜过滤器对新霉素滴眼液进行了控制菌的检查，较传统方法具有简单、快速、准确等优点，且避免供试品长时间暴露于空气中，确保试验结果的准确、可靠，值得广泛运用和推广。

【参考文献】

1 国家药典委员会.中国药典，二部.北京：化学工业出版社，2005,附录93.

作者单位：441300 湖北随州，随州市药品检验所